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一、前言
丹參 , 中藥名 ,為唇形科鼠尾草屬植物丹參的干燥根和根莖。
服用丹參能夠增強(qiáng)心肌收縮力 ,從而改善心臟功能 ,擴(kuò)張血管使血流增 加 ,有助于防治動脈硬化 。丹參本身是一種活血化瘀的中藥材 ,可以用于多 種瘀血類疾病的治療 ,特別是女性出現(xiàn)痛經(jīng)和閉經(jīng)以及產(chǎn)后腹痛等不良癥狀 時 ,可以服用丹參進(jìn)行治療 。在延緩衰老方面 ,丹參含有生物活性物質(zhì) ,一 方面可 以提高機(jī)體細(xì)胞活性 ,另一方面可 以清 除體 內(nèi) 多余 的 自 由基 , 以免 自 由基過氧化 ,從而達(dá)到延緩衰老的效果。
丹參酮類化合物是 中藥丹參 的主要功 能活性物質(zhì) ,是一類 具有抑 菌作用的脂 溶性 菲醌化合物 。2020 年版《 藥 典 》規(guī) 定 ,可利用氣相色譜法測定丹參中丹參酮類化合物的含量以控制原料質(zhì)量。
二、實(shí)驗(yàn)部分:
丹參中丹參酮類化合物含量的測定色譜法
2.1【儀器與試劑】
儀器與設(shè)備:GC9310-PRO 色譜儀;分析天平(到 0.0001g);超聲波清洗 機(jī)等。
試劑與材料:符合 GB/T6682 的一級水;甲醇、乙腈、磷酸 (色譜純);丹參酮 IIA 對 照品;0.22μm 微孔尼龍濾膜。
2.2【實(shí)驗(yàn)方法】
對照品溶液制備:
取丹參酮 ⅡA 對照品適量,精密稱定,置棕色量瓶中,加甲醇制成每 1mL 含 20μg 的 溶液,即得。
供試品溶液制備:
取本品粉末(過三號篩)約 0.3g ,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇 50mL , 密塞,稱定重量,超聲處理(功率 140W ,頻率 42kHz)30 分鐘,放冷,再稱定重量,用甲 醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。
2.3【色譜條件】
a)色譜柱: C18 4.6×250mm ,5μm 色譜柱
b)流動相A:乙腈;流動相 B :0.02%磷酸溶液;梯度程序洗脫如下表: 表 1 梯度洗脫表
時間(min) | 流動相 A | 流動相 B |
0 | 61 | 39 |
6 | 61 | 39 |
20 | 90 | 10 |
20.5 | 61 | 39 |
35 | 61 | 39 |
c)進(jìn)樣量:10 μL
d)柱溫:40℃
e)流速:1.2mL/min
f)波長:270nm
2.4【結(jié)果與討論】
1. 丹參酮 IIA 對照品溶液色譜圖如圖 1 所示,連續(xù)進(jìn)樣 7 針進(jìn)行重復(fù)性測試,丹參酮 ⅡA 的保留時間的 RSD 值為 0.090% ,峰面積的 RSD 值為 0.109%。
圖 1 丹參酮 IIA 對照品溶液色譜圖(n=7)
2. 供試品溶液色譜圖如圖2 所示,以丹參酮ⅡA 對照品為參照,以其相應(yīng)的峰為 S 峰, 計算隱丹參酮、丹參酮 I 的相對保留時間,其相對保留時間均在規(guī)定值的±5%范圍之內(nèi)。連 續(xù)進(jìn)樣 7 針進(jìn)行重復(fù)性測試,丹參酮ⅡA、隱丹參酮、丹參酮 I 的保留時間和和峰面積的 RSD 值計算如下如表 2。
圖 2 供試品溶液色譜圖(n=7)
表 2 供試品溶液重復(fù)性數(shù)據(jù)統(tǒng)計
化合物 | 平均值 | SD | RSD% |
丹參酮ⅡA | 19.265 | 0.013 | 0.067 | |
保留時間 | 隱丹參酮 | 14. 142 | 0.012 | 0.087 |
丹參酮 I | 15.363 | 0.016 | 0.105 | |
丹參酮ⅡA | 264.670 | 0.718 | 0.271 | |
峰面積 | 隱丹參酮 | 178.927 | 0.570 | 0.319 |
丹參酮 I | 78.412 | 0.409 | 0.522 |
【結(jié)論】
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,使用:GC9310-PRO 色譜儀對丹參中丹參酮類化合物進(jìn)行測 試,對照品溶液和供試品中丹參酮ⅡA 、隱丹參酮、丹參酮 I 的峰面積重現(xiàn)性良好,峰面積 RSD 值均小于 0.550% (n=7) ;供試品中丹參酮ⅡA 的理論塔板數(shù)達(dá)到了 120811.210 ,完全 滿足 2020 版《藥典》規(guī)定不低于 60000 的要求;此方法可為丹參中丹參酮類化合物的 檢測提供參考。
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